Quelles sont les exigences d'aménagement obligatoires pour les zones de tests microbiologiques et physico-chimiques au sein d'un laboratoire de contrôle de la qualité des cellules souches ?

I. Classifications de propreté obligatoires

Les zones de tests microbiologiques (tests de stérilité, limites microbiennes, tests de mycoplasmes) nécessitent un environnement propre de classe C (classe 10 000) ; un flux d'air laminaire local de classe A doit être maintenu à l'intérieur des enceintes de biosécurité ; des sas indépendants et des boîtes de passage à double porte verrouillée sont requis.

La salle de contrôle positif doit être un compartiment séparé et fermé maintenu sous une pression négative constante (-8 à -15 Pa) avec un système d'évacuation dédié pour empêcher les aérosols bactériens pathogènes de contaminer la zone de contrôle qualité plus large ; elle ne doit pas partager une pièce avec le laboratoire de microbiologie général.

Les zones de tests physicochimiques (pH, osmolalité, tests d'impuretés, titrage de réactifs, spectroscopie) nécessitent un environnement de base de classe D (classe 100 000) ; les postes de travail manipulant des acides forts, des bases fortes ou des réactifs organiques doivent être équipés de hottes indépendantes.

Contrainte critique : La salle de stérilité, la salle de contrôle positif et la salle d'essais physico-chimiques ne doivent pas être combinées en un seul espace ; une simple séparation à l'aide de cloisons en verre uniquement est interdite.

II. Normes obligatoires pour les barrières physiques et la construction des murs

Enceinte complète utilisant des cloisons de salle blanche solides et résistantes au feu ; tous les interstices dans les murs et les plafonds doivent être scellés avec du mastic ; les portes de communication directe entre les deux zones sont interdites ; le transfert des échantillons doit se faire exclusivement par des boîtes de transfert stérilisables à double porte verrouillée.

L'ensemble de la zone de contrôle qualité doit être séparé de la zone de préparation des cellules souches par des murs solides ; les conduits de ventilation de la zone de contrôle qualité ne doivent pas être connectés au système de salle blanche desservant la zone de préparation des cellules.

Les salles de stockage des réactifs et les zones de stockage temporaire des déchets/liquides dangereux doivent être situées sous le vent de la zone de tests physico-chimiques, en maintenant une distance en ligne droite d'au moins 12 à 20 mètres des zones de salles blanches microbiologiques.

III. Exigences obligatoires relatives aux différentiels de pression et à la ventilation

Gradient de pression différentielle : Zone microbiologique propre > Couloir tampon > Zone de tests physicochimiques ; la salle de microbiologie doit maintenir une pression positive de +10 à +15 Pa par rapport au couloir extérieur afin d'empêcher les vapeurs chimiques provenant de la zone physicochimique d'infiltrer les postes de travail aseptiques.

Les deux systèmes de ventilation et d'extraction des salles blanches doivent être totalement indépendants ; les systèmes d'alimentation et de reprise d'air ne doivent pas être interconnectés. Les gaz d'échappement des hottes physico-chimiques et les gaz organiques résiduaires doivent être évacués séparément vers l'extérieur, en hauteur ; les gaz d'échappement de la salle à contrôle positif doivent passer par un filtre HEPA H13 avant d'être rejetés et ne doivent pas être évacués dans les couloirs intérieurs ni dans les passages propres.

IV. Règles de séparation des flux de personnel, de matériel et de déchets

Circulation du personnel : des voies d’entrée et de sortie distinctes sont établies pour les laboratoires de contrôle qualité de microbiologie et de physicochimie ; le personnel ne peut pas passer directement des salles de physicochimie au couloir propre de microbiologie ; l’entrée dans la zone de microbiologie nécessite de suivre la séquence complète d’habillage (changement primaire, changement secondaire et sas/tampon).

Flux d'échantillons : Les échantillons de cellules souches en attente de test pénètrent d'abord dans la zone de test de stérilité microbiologique avant d'être transférés vers les postes de test physicochimiques ; il est strictement interdit que les liquides résiduels corrosifs et les résidus de réactifs provenant de la zone physicochimique retournent dans la zone propre de microbiologie.

Flux de déchets : Des voies de transfert distinctes sont établies pour les déchets liquides microbiologiques infectieux et les déchets liquides chimiques ; le transfert de matières contaminées ne doit en aucun cas traverser le couloir propre de microbiologie.

V. Direction et disposition du flux d'air

Orientation par rapport au vent dominant : la zone propre de microbiologie est située au vent, tandis que la zone de tests physico-chimiques est située sous le vent ; ceci empêche les aérosols de solvants organiques volatils de contaminer les postes de travail stériles par le vent.

Les cytomètres de flux et les équipements de test de précision sont positionnés du côté de la microbiologie, à l'écart des gaz corrosifs (acides, bases et solvants organiques) provenant de la zone physico-chimique.

VI. Exigences obligatoires en matière de compartimentation

Zone de microbiologie (Doit être des pièces séparées) : Sas tampon, salle de contrôle positif, salle de test de stérilité, salle d'incubation microbiologique et salle de stérilisation/prétraitement.

Zone physicochimique (dispositions séparées) : armoire de stockage de réactifs antidéflagrante, compartiment pour bouteilles de gaz, poste de travail ventilé et compartiment de stockage temporaire pour les déchets liquides physicochimiques.

Les lavabos, les outils de stérilisation et les uniformes de travail des deux zones doivent être conservés séparément et réservés à leurs zones respectives ; toute utilisation entre les deux zones est strictement interdite.